标本成像-传统光片显微镜的成像方式是怎么样的?
光片显微镜对一个大的样品组织进行三维成像时需要将样本细分成多个ROI成像。这种方式本质上是光片显微镜中空间分辨率和视场大小之间的折衷。
在较大的FOV下,采用一个较长的光片激发成像,该方式成像的特点在于它的成像速度快,采集图像的数据量小,且整个样品被划分的ROI较少,图像三维重构相对容易。然而,由于此时用的放大倍数较小,视野大的同时,光片也较厚,因此光片的层析能力也大幅度降低,成像结果不但在横向上的分辨率较低,其轴向上的分辨率也更低。
这时,研究者若想获取更高空间分辨率的3D成像数据,就需要使用更大的放大倍数并且采用更薄的光片。那么,成像的FOV缩小,样本成像细分的ROI将增多,导致样品在横向上的平移次数增加,此时采用的光片更薄,使得轴向上步进减小,样品成像的速度变慢。样品成像时间及采集数据大小会随着空间分辨率的增高而增加。