标本成像厂家总结了活细胞荧光成像需要考虑的因素
标本成像厂家总结了活细胞荧光成像需要考虑的因素
维持样品生理条件
在你的实验中要考虑的重要的事情是在样品准备和成像过程中保持你的样品的活力和健康度。因此，将样品保存在尽可能接近生理条件的环境中是至关重要的，即温度、pH、氧气水平和其他重要因素。
减小光压力
将活细胞暴露在光线下会产生光毒性和标本生理上的变化，所以你可能会得到与正常生理条件下实际发生的情况不同的结果。为了尽可能避免光毒性，宽场显微镜通常是活体标本成像的优选技术。他们用低剂量的LED光照射样品以激发荧光团，图像采集比其他显微镜方法如共焦成像更快。
样品的标记
在对活标本进行成像时，荧光蛋白通常是标记要研究事件发生的标本结构的首选工具，因为与其他标记相比，这些蛋白质的毒性通常较小，并绕过了抗体无法进入细胞的问题。荧光蛋白质技术依赖于基因编码的荧光团，可用于跟踪活细胞中标记的生物分子及其相互作用等。同时使用多个荧光蛋白，称为多色或多路成像，允许您同步观察多个细胞结构和过程，提供更多生理相关的结果，从而为测量增加背景(例如，使用其他标记进行活/死细胞分析或进行多色小泡观察实验)。
